關(guān)于ATCC的細(xì)胞 ,你需要知道的那些事兒

　　ATCC以生命科學(xué)領(lǐng)域*知識(shí)的獲取，分類，匯總，完善進(jìn)而廣泛傳播為己任，以期為推動(dòng)生物原料，生物信息，生物技術(shù)，知識(shí)產(chǎn)權(quán)，規(guī)范等相關(guān)領(lǐng)域的前沿性、合法化、實(shí)用性發(fā)揮一定的作用。

　　ATCC擁有目前zui大的、品種zui豐富的微生物、細(xì)胞系以及重組DNA原料，同時(shí)它也是科研工作者*的提供可靠的研究材料的供應(yīng)商。

　　ATCC的成立可追溯到1925年，一個(gè)科學(xué)委員會(huì)認(rèn)識(shí)到科學(xué)研究對(duì)于微生物的大量需求而萌發(fā)了創(chuàng)建一個(gè)微生物相關(guān)制品供應(yīng)中心的想法。

　　而今，ATCC已經(jīng)發(fā)展成了一個(gè)性的非營(yíng)利性的生物資源中心，向遍布的企業(yè)、政府以及科研機(jī)構(gòu)提供生物制品、技術(shù)支持和培訓(xùn)教程。

　　細(xì)胞模型是促進(jìn)我們對(duì)細(xì)胞生物學(xué)、分子信號(hào)通路的認(rèn)識(shí)、以及發(fā)現(xiàn)新的治療方法的一個(gè)重要工具。對(duì)基因異常引起疾病的病因?qū)W研究，以及對(duì)潛在治療方法的評(píng)估，通常都是通過相關(guān)的體外模型來完成的。

　　復(fù)蘇程序：

　　1、準(zhǔn)備細(xì)胞培養(yǎng)容器（如T-75細(xì)胞瓶），加入至少10 ml適當(dāng)?shù)呐囵B(yǎng)基，并平衡溫度及pH。

　　2、從液氮罐中取出凍存管，并在37℃（或適合該細(xì)胞的溫度）水浴中緩慢搖動(dòng)至冰晶*融化（約2 min），注意解凍過程要迅速。

　　3、從水浴中取出凍存管，浸泡或者噴撒酒精消毒。后續(xù)的操作，需在無菌操作臺(tái)中，并保證嚴(yán)格無菌。

　　4、擰開凍存管蓋，將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含有9ml*培養(yǎng)基的無菌離心管中。溫和離心(125g×10min)，棄去上清去除凍存保護(hù)劑。注意不要擾動(dòng)細(xì)胞層。加入1-2 ml*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，緩慢吹打使細(xì)胞團(tuán)變松散。將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含培養(yǎng)基的容器中充分混合。

　　5、24小時(shí)后，檢測(cè)細(xì)胞狀態(tài)。

　　注：細(xì)胞復(fù)蘇時(shí)，應(yīng)以zui快速度融化凍存的細(xì)胞溶液，然后迅速與*培養(yǎng)基混合，并接種到合適的細(xì)胞瓶中。

　　單層貼壁細(xì)胞：

　　為了保證單層貼壁細(xì)胞的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)，需要定期傳代。當(dāng)細(xì)胞生長(zhǎng)接近指數(shù)生長(zhǎng)后期(匯合率大約70%到90%)，準(zhǔn)備傳代。針對(duì)傳代過程，ATCC提供的產(chǎn)品說明中，會(huì)推薦細(xì)胞傳代分配比例和補(bǔ)充培養(yǎng)基策略。

　　單層貼壁細(xì)胞傳代，需要打斷細(xì)胞之間的連接。對(duì)于比較松散的連接，猛擊培養(yǎng)瓶側(cè)壁，可以分離細(xì)胞。很多情況下，需要胰蛋白酶/EDTA的蛋白水解酶來消化。對(duì)于一些細(xì)胞系，需要采用刮等機(jī)械方法分離細(xì)胞。細(xì)胞分離成為單細(xì)胞懸液后，稀釋到適當(dāng)?shù)拿芏炔⑥D(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中，在適當(dāng)?shù)纳L(zhǎng)培養(yǎng)基中，細(xì)胞將再貼壁生長(zhǎng)和分裂。

　　由于每種細(xì)胞都是*的，孵化時(shí)間和溫度、清洗次數(shù)或溶液配方可能會(huì)有所不同。分離過程中，應(yīng)用顯微鏡密切觀察細(xì)胞，以防止細(xì)胞損傷。這個(gè)過程根據(jù)容器使用合適的培養(yǎng)體積。